MRI-CNS جین تھراپی کے لیے NHP برین ماڈلز میں گائیڈڈ AAV ڈیلیوری - خبریں

تحقیقی پس منظر

مرکزی اعصابی نظام کی جین تھراپی تکنیکی طور پر اب بھی چیلنجنگ ہے کیونکہ علاج کے ایجنٹوں کو خون-دماغی رکاوٹ پر قابو پانا چاہیے، عین جسمانی اہداف تک پہنچنا چاہیے، اور پیچیدہ اعصابی سرکٹس کے اندر کنٹرول شدہ تقسیم کو حاصل کرنا چاہیے۔ AAV-کی بنیاد پر علاج کے لیے، علاقائی مخصوصیت کو بہتر بنانے اور نظامی نمائش کو کم کرنے کے لیے اکثر مقامی انٹراپرینچیمل ڈیلیوری کی ضرورت ہوتی ہے۔

Main components of SmartFrame — SmartFrame® (پروفائل ویو) کے اہم اجزاء میں شامل ہیں (A) اٹیچمنٹ بیس جو جانوروں کی کھوپڑی پر محفوظ صف میں گھس جاتا ہے اور سیال- بھرے تنے کے اندر رکھے ہوئے کینول کو مدد فراہم کرتا ہے۔B(1] پیلا نوب=میڈیو-لیٹرل، [2] سبز=اگلا-پچھلا، [3] ہلکا نیلا=پچ، [4] اورنج=رول)۔C) NHP کھوپڑی پر نصب SmartFrame® کا مظاہرہ۔ اس فریم کے سائز اور NHP کھوپڑی کے چھوٹے طول و عرض کی بنیاد پر، دو طرفہ نصف کرہ کے ہدف کو ایک ساتھ نہیں کیا جا سکتا۔ اسکیل بار: 3 سینٹی میٹر۔

جائزہ مضمون "اڈینو-سے وابستہ وائرل ویکٹرز کی پرائمیٹ برین میں" سلیگیو ایٹ ال کے ذریعہ، ایڈوانسڈ ڈرگ ڈیلیوری ریویو میں 2012 میں شائع ہوا؛ 64(7):598–604، DOI: 10.1016/j.2016/j.add.010.MRI-گائیڈڈ کنویکشن-بہتر ترسیل، سٹیریوٹیکٹک ٹارگٹنگ، اور ریفلکس-مزاحم کینولا ڈیزائن پرائمیٹ دماغ میں AAV ویکٹر ایڈمنسٹریشن کو بہتر بنا سکتا ہے۔ یہ مضمون خاص طور پر بائیو فارماسیوٹیکل کمپنیوں کے لیے متعلقہ ہے جو CNS جین علاج تیار کر رہی ہیں جن کے لیے قابل اعتماد غیر-انسانی پرائمیٹ ٹرانسلشنل ڈیٹا کی ضرورت ہوتی ہے۔

بنیادی ادبی تجزیہ

ماڈل اسٹیبلشمنٹ

مقالے میں AAV ویکٹرز کا استعمال کرتے ہوئے NHP CNS ڈلیوری پلیٹ فارم کی وضاحت کی گئی ہے، خاص طور پر AAV2، کے ذریعے زیر انتظامکنویکشن-بہتر ترسیل. CED دماغ کے بیچوالے خالی جگہوں کے ذریعے میکرو مالیکیولز کو تقسیم کرنے کے لیے کینولا ٹِپ سے پریشر گریڈینٹ کا اطلاق کرتا ہے، جس سے صرف پھیلاؤ کے مقابلے میں وسیع ٹشو کوریج ممکن ہوتی ہے۔

ایک اہم طریقہ کار کی پیش رفت گیڈوٹیریڈول کے ساتھ AAV2 کا مشترکہ انفیوژن تھا، ایک MRI-دیکھنے والا ٹریسر۔ مصنفین نے رپورٹ کیا کہ حقیقی-وقت کے ایم آر آئی سگنل کی تقسیم NHP دماغ میں بعد میں آنے والے ٹرانسجن اظہار کے ساتھ منسلک ہے، جو انفیوژن کے دوران ویکٹر کی تقسیم کے لیے ایک سروگیٹ مارکر کے طور پر Gadoteridol کی حمایت کرتی ہے۔

جائزہ شدہ پلیٹ فارم نے ایک کھوپڑی-ماؤنٹڈ اہیمنگ ڈیوائس، MRI-بیسڈ پلاننگ سوفٹ ویئر، اور ایک ریفلکس-مزاحم CED کینول کو بھی مربوط کیا۔ NHP کی توثیق کے مطالعے میں، نظام نے caudate، putamen، thalamus، substantia nigra، subthalamic nucleus، اور hippocampus میں ترسیل کی حمایت کی، جس کے اندر کینولا ٹپ پلیسمنٹ کی اطلاع دی گئی۔<1 mm of the visually identified target site.

A surgical planning software called iPlan Cranial® (BrainLab, Germany) was used to reconstruct a 3D spatial map of the infusion — ایک جراحی منصوبہ بندی کا سافٹ ویئر جسے iPlan Cranial® (BrainLab، Germany) کہا جاتا ہے انفیوژن کے 3D مقامی نقشے کی تشکیل نو کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔

کلیدی اختتامی نکات

مضمون میں کئی اختتامی نکات پر روشنی ڈالی گئی ہے جو NHP preclinical CNS مطالعات کے لیے انتہائی متعلقہ ہیں۔

سب سے پہلے، جسمانی اہداف کی درستگی ضروری ہے کیونکہ جگہ کا تعین کرنے کی چھوٹی غلطیاں رساو، بند-ٹارگٹ ڈسٹری بیوشن، یا نامکمل ٹشو کوریج کا باعث بن سکتی ہیں۔ پوٹامین میں، بعض پڑوسی ڈھانچے کے 3 ملی میٹر یا اس سے کم کے اندر کینولا پلیسمنٹ غریب کنٹینمنٹ سے وابستہ تھی، جب کہ آپٹمائزڈ پلیسمنٹ زونز نے ہدف-مخصوص تقسیم کو بہتر کیا۔

دوسرا، حقیقی-وقت کی MRI نگرانی تفتیش کاروں کو صرف پوسٹ مارٹم تجزیہ پر انحصار کرنے کی بجائے طریقہ کار کے دوران انفیوسیٹ تقسیم کا مشاہدہ کرنے کی اجازت دیتی ہے۔ اس سے ریفلوکس، وینٹریکولر رساو، اور ناکافی کوریج کی جلد شناخت میں مدد مل سکتی ہے۔

تیسرا، انفیوژن کی شرح ایک اہم طریقہ کار متغیر ہے۔ ابتدائی CED-کی بنیاد پر جین تھراپی کے مطالعے میں انفیوژن کی شرح کا استعمال کیا گیا تھا۔<1 μL/min and relatively small infusion volumes of 50 μL because visual feedback was unavailable. Later work showed that reflux-resistant cannulae tolerated infusion rates up to 5 μL/min, while significant reflux was observed at 8 μL/min.

اہم نتائج

ایک اہم دریافت یہ ہے۔MRI-گائیڈڈ CEDAAV انفیوژن کے دوران انٹرا-آپریٹو فیڈ بیک فراہم کر سکتا ہے، طریقہ کار کے کنٹرول کو بہتر بنا کر اور CNS ڈیلیوری اسٹڈیز میں غیر یقینی صورتحال کو کم کر سکتا ہے۔

مضمون میں تھیلامک ڈلیوری کو وسیع تر کارٹیکل ٹرانسجن اظہار کی حکمت عملی کے طور پر بھی بیان کیا گیا ہے۔ تھیلامس میں 50–60 نیوکلئیز ہوتے ہیں، اور ایک NHP مثال میں، AAV2-hGDNF/ٹریسر کا 300 μL بائیں اور دائیں تھیلامس میں بغیر رساو، ریفلکس، یا منفی طرز عمل کے اثرات کے داخل کیا گیا تھا۔ بعد میں وسیع تھیلامک تقسیم اور مضبوط کارٹیکل ٹرانسجن اظہار دیکھا گیا۔

بیسل گینگلیا کی ترسیل کے لیے، مصنفین اس بات پر زور دیتے ہیں کہ AAV2-GDNF ٹرانسپورٹ ریٹروگریڈ کے بجائے بنیادی طور پر اینٹیروگریڈ دکھائی دیتی ہے۔ یہ پارکنسنز کی بیماری کے جین تھراپی کی مخصوص حکمت عملیوں کے لیے نیگرل ڈیلیوری کے بجائے سٹرائٹل کی حمایت کرتا ہے اور نہ صرف جراحی کی رسائی کی بنیاد پر ڈیلیوری کے اہداف کو منتخب کرنے کی اہمیت کو اجاگر کرتا ہے۔

طریقہ کار کی حدود اور Prisys پریکٹس سپلیمنٹ

اگرچہ یہ جائزہ قابل قدر رہنمائی فراہم کرتا ہے، لیکن جدید منشیات کی نشوونما میں کئی حدود پر غور کیا جانا چاہیے۔ سب سے پہلے، یہ ایک واحد کنٹرول شدہ افادیت کے مطالعہ کے بجائے ایک جائزہ مضمون ہے، لہذا اس کے نتائج کو براہ راست افادیت کے معیار کے طور پر کام کرنے کے بجائے مطالعہ کے ڈیزائن کو مطلع کرنے کے لیے بہترین استعمال کیا جاتا ہے۔ دوسرا، مضمون بنیادی طور پر AAV2 پر مرکوز ہے، جبکہ موجودہ CNS پائپ لائنز اکثر انجینئرڈ کیپسڈز، متبادل سیرو ٹائپس، اور ترمیم شدہ اظہار کے نظام کا استعمال کرتی ہیں۔ ہر ویکٹر ٹراپزم، اظہار حرکیات، بایو ڈسٹری بیوشن، اور مدافعتی پروفائل میں مختلف ہو سکتا ہے۔

اس کے علاوہ، MRI-مرئی ٹریسر کی تقسیم ایک سروگیٹ ریڈ آؤٹ بنی ہوئی ہے۔ مضبوط ترجمے کی تشریح کے لیے، اسپانسرز کو امیجنگ کو ویکٹر جینوم بائیو ڈسٹری بیوشن، ٹرانسجین ایکسپریشن، ہسٹوپیتھولوجی، نیورو بیہیویورل مانیٹرنگ، اور فارماکوڈینامک اینڈ پوائنٹس کے ساتھ جوڑنا چاہیے۔

Prisys Biotech میں، ہمارےNHP CNS فارماسولوجی پلیٹ فارمترجمہی افادیت کے اختتامی نکات کے ساتھ حسب ضرورت غیر-ہیومن پرائمیٹ CNS ڈیلیوری اسٹڈی ڈیزائن اور مربوط MRI-کی بنیاد پر جسمانی تشخیص کی حمایت کرتا ہے۔ یہ صلاحیتیں سپانسرز کو ڈیلیوری کی درستگی کو حیاتیاتی نتائج سے مربوط کرنے میں مدد کرتی ہیں، بشمول ویکٹر بائیو ڈسٹری بیوشن، ہدف کی مصروفیت، رویے میں تبدیلیاں، اور حفاظتی مشاہدات۔

منشیات کی نشوونما کے لیے عملی مضمرات

یہ مضمون CNS جین تھراپی میں ایک اہم اصول کو تقویت دیتا ہے: ترسیل کی حکمت عملی علاج کی مصنوعات کی حکمت عملی کا حصہ ہے۔ ویکٹر ڈیزائن، جسمانی ہدف کا انتخاب، کینول پلیسمنٹ، انفیوژن والیوم، انفیوژن کی شرح، اور حقیقی-وقت کی نگرانی سبھی اس بات پر اثر انداز ہوتے ہیں کہ آیا کوئی تھراپی مطلوبہ ٹشو تک پہنچتی ہے اور قابل تشریح افادیت کا ڈیٹا تیار کرتی ہے۔

بائیو فارماسیوٹیکل کمپنیوں کے لیے،NHP ماڈلزخاص طور پر اس وقت قیمتی ہوتے ہیں جب علاج کی کارکردگی پرائمیٹ-متعلقہ دماغی اناٹومی اور عصبی رابطے پر منحصر ہو۔ چوہوں کے مطالعے سے ابتدائی ثبوت-کے-تصور کی حمایت ہو سکتی ہے، لیکن وہ پرائمیٹ سی این ایس اہداف جیسے پوٹامین، تھیلامس، سبسٹینٹیا نیگرا، اور کارٹیکل پروجیکشن سسٹمز کے پیمانے اور ساختی پیچیدگی کو مکمل طور پر دوبارہ پیش نہیں کر سکتے۔

Prisys Biotech عالمی اسپانسرز کو ان اصولوں کو قابل عمل NHP preclinical پروگراموں میں ترجمہ کرنے میں مدد کرتا ہے، بشمول فزیبلٹی اسیسمنٹ، سٹیریوٹیکٹک ڈیلیوری پلاننگ، طول بلد نگرانی، نمونہ جمع کرنے کی حکمت عملی، اور مربوط افادیت کی تشریح۔

اس بات پر بحث کرنے کے لیے کہ ہماری NHP CNS Gene Therapy Preclinical Evaluation Service آپ کی AAV یا حیاتیاتی پائپ لائن کو کس طرح سپورٹ کر سکتی ہے، اپنی مرضی کے مطابق اسٹڈی ڈیزائن مشاورت کے لیے Prisys Biotech سے رابطہ کریں۔

Prisys Biotech سے رابطہ کریں۔

حوالہ جات

Salegio EA، Samaranch L، Kells AP، Forsayeth J، Bankiewicz KS. پرائمیٹ دماغ میں ایڈینو-وائرل ویکٹرز سے وابستہ گائیڈڈ ڈیلیوری۔ DOI: 10.1016/j.addr.2011.10.005۔
Bobo R, Laske D, Akbasak A, Morrison P, Dedrick R, Oldfield E. Convection-دماغ میں macromolecules کی بہتر ترسیل۔ PNAS. 1994;91:2076–2080۔ DOI: 10.1073/pnas.91.6.2076.
Su X, Kells AP, Aguilar Salegio EA, Richardson RM, Hadaczek P, Beyer J, Bringas J, Pivirotto P, Forsayeth J, Bankiewicz KS. Gadoteridol کے ساتھ ریئل ٹائم ایم آر امیجنگ-AAV2 ویکٹرز کی بہتر ترسیل کے بعد ٹرانسجنز کی تقسیم کی پیش گوئی کرتی ہے۔ مالیکیولر تھراپی. 2010;18:1490–1495۔ DOI: 10.1038/mt.2010.114.
رچرڈسن RM، Kells AP، Martin AJ، Larson PS، Starr PA، Piferi PG، Bates G، Tansey L، Rosenbluth KH، Bringas JR، Berger MS، Bankiewicz KS۔ ایم آر آئی کے لیے نیا پلیٹ فارم-گائیڈڈ کنویکشن-علاج کی بہتر ترسیل: غیر انسانی پرائمیٹ دماغ میں طبی توثیق۔ دقیانوسی اور فنکشنل نیورو سرجری. 2011؛ 89:141–151۔ DOI: 10.1159/000323544۔